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大腸桿菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測(cè)。大腸桿菌顯藍(lán)綠色,大腸菌群顯無色,其它菌顯黃色或無色,革蘭氏陽性菌被抑制。
成份(g/L)
特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) | 37.9 |
顯色劑 | 0.2 |
瓊脂 | 12.0 |
pH 6.8±0.2 25℃ |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得Z佳的結(jié)果。
用法
稱取本品 50.1g 加入 1000ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。分裝三角瓶,121℃ 高壓滅菌 15 分鐘。取 1ml 制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心,傾入冷卻至 45-50℃ 培養(yǎng)基約 15ml,混勻,凝固后,36℃ 倒置培養(yǎng) 18~24h 。或冷卻至 45-50℃ 時(shí),傾入無菌平皿,瓊脂*凝固后,在 37℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí),加入適當(dāng)稀釋度的樣品液 1ml,涂布于培養(yǎng)基上,36℃ 培養(yǎng)18~24h。
操作步驟
1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上;
3、36℃ 培養(yǎng)18~24h,選用有 30~200 個(gè)菌落的平板,計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
總大腸桿菌=藍(lán)綠色菌落;
4、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,36℃ 培養(yǎng) 12-16 小時(shí),挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(本公司有生化鑒定管套裝 4種x4套)。
質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗(yàn)
在 36℃ 培養(yǎng) 18~24h 小時(shí):
質(zhì)控菌株 | ATCC | 生長(zhǎng)情況 | 菌落顏色 |
單增李氏菌 | 19114 | -/+ | 無色 |
金黃色葡萄球菌 | 25923 | -/+ | 無色 |
大腸桿菌 | 25922 | +++ | 藍(lán)色 |
沙門氏菌 | 14028 | +++ | 無色 |
產(chǎn)氣腸桿菌 | 23355 | +++ | 無色 |
方法的局限性
本培養(yǎng)基鑒定大腸桿菌,少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽性,但不會(huì)出現(xiàn)假陰性,有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,大腸菌群為無色菌落,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 大腸桿菌ATCC25922 | 大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 產(chǎn)氣腸桿菌ATCC35029 |
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 沙門氏菌ATCC14028 | 大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 陰溝腸桿菌ATCC23355 |
貯存
制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
參考文獻(xiàn)
1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988).
2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976).
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基的微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。
注:回收率計(jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。
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